Vitamin B3 / B5 (LCMSMS)

Nicotinsäure und deren Amid sind die geläufigen Formen des B-Vitamins Niacin (Vitamin B3). Nicotinsäure findet sich in allen lebenden Zellen und wird in der Leber gespeichert. Sie bildet einen wichtigen Baustein verschiedener Coenzyme (NAD, NADP) und ist in dieser Form von zentraler Bedeutung für den Stoffwechsel von Eiweißen, Fetten und Kohlenhydraten. Gegenüber Hitze, Licht und dem Luftsauerstoff ist Nicotinsäure weniger empfindlich als andere Vitamine der B-Gruppe.

Vitamin B5 entsteht aus Pantoinsäure und ß-Alanin. Es ist wichtig für die Bildung von Coenzym A, welches z.B. als Acetyl-CoA oder Malonyl-CoA eine wichtige Rolle im Kohlehydrat-, Aminosäure- und Fettstoffwechsel spielt. Daneben ist es wichtig für die Bildung von Cholesterin und damit für den Aufbau von Steroidhormonen.

Ein Mangel manifestiert sich in Müdigkeit, Schlaflosigkeit, Depressionen, tauben oder schmerzenden Muskeln, Anämie, Immunschwächen und Magenschmerzen.

Größere Mengen an Pantothensäure kommen vor allem in Innereien, Vollkornprodukten, Eiern, Nüssen, Reis, Obst, Gemüse, Milch und Bierhefe vor.

Technische Daten

Probe Serum, Plasma
Probenvolumen 200 µl
Detektor MSMS (AB Sciex Instruments API 4000)
Methode Gradient
Bestimmungen 100

Bestellinformationen

IC3500 Testkit
IC3500ko Kontrollen (2 Level je 250µl lyophilisiert)
IC3500rp HPLC Trennsäule

Prinzip der Methode

Zur Bestimmung des Vitamin B3 und B5 wird zunächst ein Fällungsschritt, bei dem höhermolekulare Substanzen abgetrennt werden, durchgeführt. Nachdem die Probe zentrifugiert wurde, wird der Überstand abgenommen und in das LCMSMS-System injiziert.

Die Trennung mittels HPLC erfolgt durch Anlegen eines Gradienten aus Laufmittel A und B bei 20-25 °C auf einer „reversed phase“ Säule. Sie benötigt ca. 6 Minuten. Die Aufnahme der Chromatogramme erfolgt mit einem MSMS-Detektor. Die Quantifizierung erfolgt über den mitgelieferten Kalibrator. Die Berechnung der Ergebnisse wird über die „Interne Standard-Methode“ anhand der Integration der Peakhöhen oder Peakflächen durchgeführt.